hplc溶剂，hplc溶剂干了？

本文目录一览：

• 1、配置hplc流动相的溶剂需选择什么纯的
• 2、安捷伦hplc溶剂混合的时候异响
• 3、为什么要hplc使用前要用不同溶剂洗脱
• 4、高效液相色谱溶剂配制注意问题有哪些
• 5、HPLC检测金银花中的绿原酸时,溶解样品的溶剂为什么用50%的甲醇溶液,而...
• 6、hplc实验中溶剂的极性如何选择

配置hplc流动相的溶剂需选择什么纯的

分析实验室用的都是色谱纯级别的。因为对实验结果要求比较高，而且分析实验用的试剂量不多。用于半制备或制备的HPLC流动相很多选择分析纯的试剂，尤其用量非常大的，比如甲醇。

但粘度过低的溶剂也不宜用，如戊烷等，它们容易在色谱柱和检测器内形成气泡，影响分离。化学稳定性好。流动相应满足检测器的要求。对于紫外吸收检测器，应注意选用检测器波长比溶剂的紫外截止波长长。

如果流动相中有乙醇成分，一定要使用色谱纯。如果流动相中没有乙醇成分，可以使用分析纯。

安捷伦hplc溶剂混合的时候异响

所有液相的泵都会响的。那是泵的弹簧被压缩时的响声。别大惊小怪。跟盐析没关系。有盐析也不是拆泵处理。而是用柱塞杆清洗的那管子自己加超纯水洗一下就行了。所有液相的泵都会响的。那是泵的弹簧被压缩时的响声。

可能是流动相气泡导致的。在线脱气装置可以脱去一部分气泡，但是如果水和有机相比例比较大，产生气泡比较多的时候，建议手动混合，然后减压抽滤脱气。管路中也有可能存在气泡，可以卸掉色谱柱，然后用异丙醇低流速冲洗管路。

溶剂延迟时间大于溶剂的流出时间。另外，进样（如1μl，分流比40：1)后，不打开MS，观察真空度的变化，如果真空度变低，则就是溶剂出峰时间。

为什么要hplc使用前要用不同溶剂洗脱

一般来说，要让硅胶半透明，就是要尽量排出柱中的空气。柱中如果有空气，则有空气处硅胶与待分离物结合不好，分离效率下降。更重要的是，由于硅胶中的空气会造成洗脱剂流速变化，色谱带容易展宽。

组分的极性较弱，就应选用吸附性较强（即活性较高）的吸附剂，用极性较小的溶剂进行洗脱。化合物极性与其结构有关。

使用高效液相色谱仪进行分析时，常用两种洗脱方式，一种为等度洗脱，另一种为梯度洗脱。用等度洗脱进行色谱分离时，由不同溶剂构成的流动相的组成，如流动相的极性、离子强度、pH值等，在分离的全过程中皆保持不变。

用柱色谱技术的一种高效液相色谱法，样品展开方式用洗脱法。根据不同的分离方式，离子色谱可以分为高效离子色谱 、离子排斥色谱和流动相离子色谱3类。高效离子色谱法使用低容量的离子交换树脂，分离机理主要是离子交换。

一般色谱图约于20分钟内记录完毕，以适应具体品种并达到系统适用性试验的要求。如所用流动相为含盐流动相，反相色谱柱使用后，先用水或低浓度甲醇水（如5％甲醇水溶液），再用甲醇冲洗。

高效液相色谱溶剂配制注意问题有哪些

液相色谱法所用流动相使用时应注意问题如下：尽量使用高纯度溶剂作流动相，防止微量杂质长期累积损坏色谱柱和使检测器噪声增加。不纯的溶剂会引起基线不稳，产生伪峰。

高效液相色谱分析操作应注意：1)．流动相均需色谱纯度，水用20M的去离子水。脱气后的流动相要小心振动尽量不引起气泡。2)． 柱子是非常脆弱的，第一次做的方法，先不要让液体过柱子。

)． 柱子是非常脆弱的，第一次做的方法，先不要让液体过柱子。3)． 所有过柱子的液体均需严格的过滤。

配置的盐溶液用滤膜过滤 常规液相用0.45m滤膜过滤，高效液相色谱使用0.2m滤膜过滤。水或缓冲盐溶液置于棕色瓶中，以防长菌，阻塞溶剂过滤器，降低泵的操作性能。质谱分析不能使用不挥发性盐作为流动相。

HPLC检测金银花中的绿原酸时,溶解样品的溶剂为什么用50%的甲醇溶液,而...

1、Hplc仪器，一般用的流动相都是甲醇，甲醇最为常用。hplc没工作的时候，色谱柱也是泡在甲醇里面的。要测量其他液体需要先怕甲醇排掉。其次，做hplc不是溶解度越高就越好。

2、对照品与供试品的前处理可以不一样，这样的实例在美国药典、欧洲药典和英国药典经常见到。

3、能更好地提取绿原酸。以乙醇为溶剂提取金银花中的绿原酸，提取液中杂质较少，绿原酸含量较水提要高，得率也有很大提升。

4、绿原酸对照品溶液的制备：称取绿原酸对照品3 mg，用20％乙腈溶解并定容至25 mL，即得。黄芩甙对照品溶液的制备：称取黄芩甙对照品9 mg，用50％甲醇溶液溶解并定容至25 mL，即得。

hplc实验中溶剂的极性如何选择

反向色谱，一般是先选择极性大的，比如乙腈，后选择极性小的，但可多时候要加三氟乙酸（乙酸、磷酸、柠檬酸）和三乙胺（醋酸铵）等调节PH值。如有疑问，请追问。

溶剂极性由小到大的是石油醚、乙醚、醋酸乙酯。

一般的选择规律是：样品极性较大，在极性吸附剂柱上进行分离，则应选用吸附性较弱（即活性较低）的吸附剂，用极性较大的溶剂进行洗脱。

这个只能有个大致的判断，具体的还要看结构而定，一般来说极性从小到大为；烷，烯，醚，酯，酮，醛，胺， 酚，酸，苯，乙醚，氯仿，乙酸乙酯，正丁醇，丙酮，乙醇，乙腈，甲醇，水。

极性相近原则：极性大的聚合物溶于极性大的溶剂中，极性小的聚合物溶于极性小的溶剂中，非极性的聚合物溶于非极性的溶剂中。