嘌呤霉素？嘌呤霉素抑制蛋白质合成的机制是？

本文目录一览：

• 1、嘌呤霉素的基本信息
• 2、嘌呤霉素的介绍
• 3、如何根据嘌呤霉素实验的结果判断核糖体中的A、P是两个分开的独立位点...
• 4、puro抗性筛选原理
• 5、嘌呤霉素有什么作用?

嘌呤霉素的基本信息

他们使小鼠学走迷宫。当小鼠刚刚认识了迷宫中的正确道路以后，立即给它们注射一种药物——嘌呤霉素。这种药物能干扰由RNA合成蛋白质的过程。于是，小鼠忘掉了它们刚认识的正确道路，走不出迷宫了。

在金鱼建立条件反射的过程中，如用嘌呤霉素(puromycin)注入动物脑内以抑制脑内蛋白质的合成，则运动不能完成条件反射的建立，学习记忆能力发生明显障碍。人类的第二级记忆可能与这一类机制关系较大。

饮食治疗是大多数脂肪肝病人治疗的基本方法，也是预防和控制脂肪肝病情进展的重要措施。众所周知，热能的来源为食物中的蛋白质、脂肪和糖类，其需要量与年龄、性别和工种等因素有关。

在神经生化方面，较长时的记忆可能与脑内蛋白质的合成有关。在金鱼建立条件反射的过程中，如果用嘌呤霉素抑制脑内蛋白质的合成，则动物不能建立条件反射，学习记忆能力发生明显障碍。

嘌呤霉素的介绍

1、（2）制备筛选培养基：含有最佳筛选浓度嘌呤霉素（由杀灭曲线确定）的新鲜培养基；（3）day 1：筛选第一天，去除旧的培养基，加入一定量MOI的病毒颗粒；（加入无血清培养基的总量必须充分覆盖住细胞。

2、中文名为嘌呤霉素，常用于筛选通过质粒转染/转化、病毒感染等方法能表达pac基因(puror)的真核或原核多克隆或单克隆细胞。

3、在第二组实验中，由于A位点已经被二肽酰tRNA占据，所以嘌呤霉素无法与A位点结合，只有加入延伸因子和GTP后，使A位点腾空，嘌呤霉素才能结合到核糖体上。因此两根据这两组实验结果可以断定A、P是两个独立的功能位点。

4、（5）四环类抗生素，都具有四个缩合苯环，如四环素（6）嘌呤类抗生素，都含有嘌呤环，如嘌呤霉素。

5、药物性脂肪肝。某些药物或化学毒物通过抑制蛋白质的合成而致脂肪肝，如四环素、肾上腺皮质激素、嘌呤霉素、环已胺、吐根碱以及砷、铅、银、汞等。降脂药也可通过干扰脂蛋白的代谢而形成脂肪肝。妊娠脂肪肝。

6、兽药GSP企业）都可以买到，兽用生物制品要到正规的具有生物制品经营权的经营企业购买，一般兽药店无经营权，但是不排除有非法经营的。

如何根据嘌呤霉素实验的结果判断核糖体中的A、P是两个分开的独立位点...

A位点：氨基酸部位或受位；主要在大亚基上，是接受氨酰基-tRNA的部位，受氨基酸-tRNA；受肽链核苷酸与氨基酸相连系的桥梁是tRNA。P位点：肽基部位或供位；主要在小亚基上，是释放tRNA的部位。供tRNA；供肽链。

另一种是三位点模型，认为除A和P位外，还存在一个aa-tRNA结合位点。在原核生物三个位点(E位点)已被证实，而真核生物资料还不充分。已发现兔肝80S核糖体有三个aa-tRNA结合位点。

①、原核细胞：细胞较小，无核膜、无核仁，没有成形的细胞核；遗传物质(一个环状DNA分子)集中的区域称为拟核；没有染色体，DNA 不与蛋白质结合，；细胞器只有核糖体；有细胞壁(主要成分是肽聚糖)，成分与真核细胞不同。

第一步，看箭头：大多数质粒都会有箭头，箭头有两种解释。一种是转录方向，转录方向主要是由启动子开始的一个大箭头，是启动子启动序列的顺序。

fMet-tRNAf加入，形成30S起始复合物；IF1，IF2，IF3，GDP，Pi释放，50S大亚基加入，形成70S起始复合物。

puro抗性筛选原理

1、（6）考虑筛选标记的冲突，例如目的细胞是通过慢病毒转染的方法稳定表达Cas9，且筛选标记是puromycin，那么几乎所有的Library的抗性筛选基因都是puromycin，这就冲突了。具体更多的细节还需要我们去发现。

2、然后使用Taq DNA 聚合酶，以细胞的cDNA为模板进行PCR，产物经琼脂糖凝胶电泳或割胶回收目的大小片段(图17)。

3、第二步，看上面的标签。报告基因：通常会有一两个蛋白，被用作报告基因，比如常见的copGFP（绿色荧光蛋白），Puro（嘌呤霉素），Lacz（乳糖操纵子）等等。

4、G418是常用的一种，还有很多药物可以用来筛选稳定株，比如puro等，就看你的细胞或质粒带什么抗性了。

5、抗体抗原结合。Puro是指嘌呤霉素，嘌呤霉素是一种嘌呤抗体，筛选的基本原理就是讲嘌呤霉素玉嘌呤霉结合，达到抗原与抗体相互结合，大量的结合就会产生出沉淀，起中的沉淀就是嘌呤霉素。

嘌呤霉素有什么作用?

嘌呤霉素(puromycin；PM ) 是一种蛋白质合成抑制剂，它具有与tRNA分子末端类似的结构，能够同氨基酸结合，代替氨酰化的tRNA同核糖体的A位点结合，并掺入到生长的肽链中。

抑制蛋白质的合成：抑制的作用点很多。（1）抑制氨基酸的活化。例如，吲哚霉素是色氨酸的类似物。（2）抑制蛋白质合成的起始。如氨基环醇类抗生素。链霉素与小亚基结合。（3）抑制肽链的延伸。如四环素，封闭小亚基的氨酰位点。

可以不加，有时候加了会有拮抗作用。1）24孔板内以5~8 x 104 cells/孔的密度铺板，铺足够量的孔以进行后续的梯度实验。

嘌呤霉素氨基核苷(puromycin aminonucleoside，PAN)是研究微小病变型肾病(minimal-change nephropathy syndrome，MCNS)和局灶节段性肾小球。pan诱发肾病。

从而起杀菌作用。3）抑制蛋白质的合成。能抑制蛋白质合成的抗生素很多，其作用机理也较复杂，主要有下面 4 个方面：①抑制氨酰-tRNA 的形成。