二甲苯青+橙黄不会干扰测序结果。测序结果常见问题:残存的染料单体造成的干扰峰所致,该干扰峰和正常序列峰重叠在一起。另外,测序电泳开始阶段电压有一个稳定期等。混合在一起组成的Mix染料对测序结果没影响。
所以这种检测方法仅仅能测定是否有蛋白质的污染。一般提取DNA的过程中,RNA污染几乎是不能避免的,尤其是用某些生长旺盛的组织提取DNA,这些组织往往RNA的表达量都非常大。所以电泳时能够看到RNA的部分。
样品太浓或没有充分稀释,如果样品太浓或没有充分稀释,则可能导致蛋白质在电泳过程中过度聚集或不完全脱变性,形成白色条带。可能是凝胶电泳过程中处理样品的方法有误,检查操作步骤是否正确执行,设备是否正常等问题。
如果空白对照的亮带在别的泳道里也有,就是污染了,做PCR体系用的水很容易被污染,我的引物也有过污染的时候,电泳液里也可能留下跑胶时跑出去的核酸物质。不知道你P的是质粒,菌液,cDNA,还是细胞培养经过处理的产物。
第一,里边的指示剂溴酚蓝和二甲苯氰FF起到指示的作用,显示电泳的进程,以便我们适时终止电泳;第二,里边的成分甘油可以加大样品密度,使样品密度大于TAE,从而沉降到点样孔中,防止样品飘出点样孔。
第一,里边的指示剂溴酚蓝和二甲苯酚起到指示的作用,显示电泳的进程,以便我们适时终止电泳;第二,里边的成分甘油可以加大样品密度,使样品密度大于TAE,从而沉降到点样孔中,防止样品飘出点样孔。
二甲苯青携带的电荷量比溴酚蓝少,在凝胶中的迁移率比溴酚蓝慢。溴酚蓝在琼脂糖凝胶中的迁移速度约为二甲苯青的2倍,这与琼脂糖凝胶的浓度无关。
蓝色条带分别是溴酚蓝和二甲苯青FF(请注意不是二甲苯氰)。溴酚蓝在琼脂糖中的泳动速率约与长300bp的双链线状DNA相同,而二甲苯青FF的泳动则与长4kb的双链线状DNA相同。希望能够对你有所帮助。
在需要电泳的DNA溶液里加上loading buffer,目的是在电泳时可以看到指示带,有两条:跑在前面的蓝色条带是溴酚蓝,位置大约相当于300bp的DNA,后面的绿色条带是二甲苯青FF,相当于4000bp左右大小DNA的位置。
跑胶过程中留下的两条蓝线是loading buffer中的指示剂。loading buffer中含有甘油、蔗糖和溴酚蓝或二甲苯青等物质,这些物质在电泳过程中会移动,并留下蓝色的条带。这些条带并非DNA条带,而是指示剂的移动轨迹。
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